携带microRNA-383重组慢病毒的包装及其上调PBMCs中Foxp3mRNA的表达
Packaging of the recombinant lentivirus delivering microRNA-383 sequences and its positive effects on Foxp3 mRNA in human PBMCs推荐 CAJ下载 PDF下载 不支持迅雷等下载工具，请取消加速工具后下载。

免疫学杂志 , Immunological Journal,
编辑部邮箱 , 2011年10期 【作者】 周峰； 张庆； 张海清； 刘晓梅； 史震； 郑葵阳；

【Author】 ZHOU Feng,ZHANG Qing,ZHANG Haiqing,LIU Xiaomei,SHI Zhen,ZHENG Kuiyang Department of Pathogen Biology and Immunology,Xuzhou Medical College,Xuzhou 221004,China

【机构】 徐州医学院病原生物学与免疫学教研室； 江苏省徐州市肿瘤医院检验科；

【摘要】 目的包装携带microRNA-383(miR-383)的重组慢病毒,并观察其对正常人外周血单个核细胞(peripheral bloodmononuclear cells,PBMCs)中Foxp3 mRNA转录的影响。方法将4个串联的miRNA-383前体序列亚克隆入慢病毒转移载体pHAGE-CMV-MCS-IZsGreen,构建重组载体,命名为pHAGE-miR-383。将pHAGE-383、包装质粒psPAX2与包膜质粒pMD2.G共转染入HEK 293T细胞进行重组慢病毒包装。进而分别采用定量PCR和RT-PCR检测慢病毒miR-383和Mock感染48 h后细胞中的miR-383的表达和转录因子Foxp3 mRNA的转录水平。结果定量PCR证实携带miR-383的重组慢病毒包装成功,滴度为1×107 TU/ml。以MOI为5的慢病毒感染HEK 293T细胞后miR-383表达明显增多。RT-PCR结果显示,miR-383能够上调PBMCs中Foxp3 mRNA的表达。结论成功包装出含有miR-383前体序列的重组慢病毒,而且慢病毒miR-383能够上调PBMCs中Foxp3 mR... 更多还原

【Abstract】 MicroRNAs(miRNAs)-mediated RNA interference is a vital regulatory pathway for many biological processes,such as development,differentiation,and homeostasis.As potent immune regulators,regulatory T cells(Tregs) are strictly regulated by Foxp3,a transcription factor.To produce the recombinant lentivirus containing pre-microRNA-383(miR-383) sequences and to determinate the effect miR-383 on FOXP3 mRNA level in human peripheral blood mononuclear cells(PBMCs),four pre-miR-383 sequences in series were... 更多还原
【关键词】 慢病毒； microRNA-383； PBMCs； Foxp3mRNA；
【Key words】 Lentivirus； MicroRNA-383； PBMCs； Foxp3 mRNA；
【基金】 江苏省高校自然科学研究课题(09KJD310012)【分类号】R392

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