截短型H1N1神经氨酸酶基因的表达及其抑制剂的高通量筛选(英文)
Expression of a Truncated H1N1 Neuraminidase and High-throughput Screening of its Inhibitor推荐 CAJ下载 PDF下载 不支持迅雷等下载工具，请取消加速工具后下载。

中国天然药物 , Chinese Journal of Natural Medicines,
编辑部邮箱 , 2011年05期 【作者】 林军； 胡海峰； 胡又佳； 朱宝泉；

【Author】 LIN Jun1,HU Hai-Feng1,HU You-Jia1,2,ZHU Bao-Quan1,2 1 Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry,China State Institute of Pharmaceutical Industry,Shanghai 200040,China;2 State Key Laboratory of New Drug and Pharmaceutical Process,Shanghai 200437,China

【机构】 中国医药工业研究总院上海医药工业研究院； 创新药物与制药工艺国家重点实验室；

【摘要】 目的:利用毕赤酵母表达具有生物活性的H1N1神经氨酸酶并从发酵提取物中筛选其新型抑制剂。方法:截短型H1N1神经氨酸酶编码基因被亚克隆进质粒pPICZαA中以构建重组质粒pPICZαA-NA,线性化的质粒pPICZαA-NA经电转化导入毕赤酵母SMD1168中。随后,诱导鉴定正确的重组子分泌表达重组神经氨酸酶,进而利用该重组酶构建神经氨酸酶抑制剂的高通量筛选模型以用于发酵提取物的筛选。结果:重组菌株能够分泌表达具有生物活性的截短型H1N1神经氨酸酶,该酶受到两种已知神经氨酸酶抑制剂(奥司他韦和扎纳米韦)的显著抑制。在此基础上,筛选了20000多个发酵提取物,其中6个提取物对神经氨酸酶产生大于50%的抑制率。结论:具有生物活性的截短型神经氨酸酶可用于构建其新型抑制剂的高通量筛选模型。与从病毒中提取不同,利用毕赤酵母中制备神经氨酸酶制备的方法安全简便,这有利于促进高通量筛选神经氨酸酶新型抑制剂的研究。 更多还原

【Abstract】 AIM:To produce the H1N1 neuraminidase(NA) with catalytic activity by Pichia pastoris and screen novel inhibitors of NA from the extracts of microbial fermentation broths.METHODS:The truncated H1N1 NA coding gene was cloned into plasmid pPICZαA to construct the recombinant plasmid pPICZαA-NA,which was linearized and then electroporated into P.pastoris SMD1168.The correct transformants were induced by methanol for the expression of recombinant NA,which was then used to construct a high-throughput ... 更多还原
【关键词】 神经氨酸酶； 基因克隆； 表达； 筛选；
【Key words】 Neuraminidase； Gene cloning； Expression； Screen；
【基金】 supported by the National Important Special Foundation of the New Drug Development (No. 2009ZX09301-007);the National Natural Science Foundation of China (No. 81102352);the 47th China Postdoctoral Science Foundation (No. 20100470721)~~【分类号】Q781
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