细胞与分子免疫学杂志 , Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology,
编辑部邮箱 , 2011年10期
【作者】 周晓芳； 陆仁飞； 陈倩； 储钰丹； 王学谦； 钱天梅； 顾星星；

【Author】 ZHOU Xiao-fang1, LU Ren-fei2, CHEN Qian1, CHU Yu-dan1, WANG Xue-qian1, QIAN Tian-mei1, GU Xing-xing1* 1Key Laboratory of Neuroregeneration, Nantong University, Nantong 226001; 2Department of Clinical Laboratory, Third People’s Hospital of Nantong City, Nantong 226001, China

【机构】 南通大学神经再生重点实验室； 南通市第三人民医院检验科；

【摘要】 目的:制备兔抗多疣壁虎Hoxc10抗血清并进行特性鉴定。方法:构建pGEX-4T1-g-Hoxc10质粒,转化大肠杆菌BL21后,在异巯基-1-硫代-β呋喃半乳糖(IPTG)诱导下,表达谷胱甘肽S-转移酶(GST)-g-Hoxc10蛋白。用亲和层析纯化的融合蛋白免疫大白兔,制备Hoxc10抗血清。用Western blot和免疫组化染色法检测Hoxc10抗血清的特性。结果:构建的多疣壁虎Hoxc10基因的原核表达质粒pGEX-4T1-g-Hoxc10,在大肠杆菌中获得高效表达。表达产物经亲和层析纯化后得到高纯度的Hoxc10融合蛋白,以其免疫大白兔获得较高效价的Hoxc10抗血清。Western blot及免疫组化染色法检测显示,所得抗血清具有较高的效价及特异性。结论:利用原核表达的多疣壁虎GST-g-Hoxc10融合蛋白制备的Hoxc10抗血清效价高,特异性良好,为进一步深入研究Hoxc10的功能提供了重要的制剂。 更多还原

【Abstract】 AIM: Prepare the rabbit antiserum against gecko japonicus Hoxc10 and to identify its properties. METHODS: Prokaryotic expression vector of g-Hoxc10 were constructed and then transform into E.coli (BL21). To make GST-g-Hoxc10 fusion protein in E.coli (BL21) under the optimized induction of Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside(IPTG). The recombination proteins were purified using affinity chromatography. The purified fusion protein was inoculated into adult rabbits to develop antiserum. Western b... 更多还原
【关键词】 多疣壁虎； Hoxc10； 融合蛋白； 抗血清； 兔；
【Key words】 Gekko japonicus； Hoxc10； fusion protein； antiserum； rabbit；
【基金】 国家自然科学基金资助项目(30671046;31071288);南通大学博士基金项目(07B21)【分类号】R392.11

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