细胞与分子免疫学杂志 , Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology, 编辑部邮箱 , 2011年10期 【作者】 张亚宁; 李晓玥; 耿晓娜; 赵宝华;
【Author】 ZHANG Ya-ning, LI Xiao-yue, GENG Xiao-na, ZHAO Bao-hua* College of Life Science, Hebei Normal University, Shijiazhuang 050016, China
【机构】 河北师范大学生命科学学院;
【摘要】 目的:构建重组菌株BL21(DE3)(pET-28a-OmpS2),制备防治鱼类爱德华氏菌病的基因工程疫苗。方法:根据GenBank报道的致病性迟缓爱德华菌外膜蛋白OmpS2基因(AY078509)序列设计引物,通过PCR扩增得到大小为1284bp的迟缓爱德华菌(E.t.)HB01的外膜蛋白基因OmpS2。将该基因定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,并转化大肠杆菌BL21(DE3),得到重组菌株BL21(DE3)(pET-28a-OmpS2)。经IPTG诱导后,由SDS-PAGE分析可见Mr在47000的特异蛋白条带。结果:Westernblot检测说明表达的外膜蛋白具有较好的反应原性。将重组菌株BL21(DE3)(pET-28a-OmpS2)制成基因工程疫苗,与嗜水气单胞菌(A.h.)溶血素(Hly)基因工程疫苗联合使用分别免疫小鼠与牙鲆(Paralichthys olivaceus)后,获得了较高的保护率,ELISA实验结果表明两种基因工程疫苗均能产生较高抗体水平。结论:本实验制备的基因工程疫苗能有效的预防鱼类爱德华氏菌病,且保护率高,能够起到免疫预防效果。 更多还原
【Abstract】 AIM: To construct a recombinant strain BL21(DE3)(pET-28a-OmpS2), and obtain a genetic engineering vaccine to provide protective immunity against diseases caused by Edwardsiella tarda. METHODS: According to the GenBank sequences (GenBank Accession No. AY078509), one pair of primers was designed and the outer membrance protein gene (OmpS2) of Edwardsiella tarda HB01 was amplified by PCR. The OmpS2 gene was cloned in pET-28a vector and transformed into Escherichia coli BL21(DE3). The OmpS2 protein ... 更多还原 【关键词】 牙鲆; 腹水病; 迟缓爱德华菌; 嗜水气单胞菌; 免疫原性; 【Key words】 Paralichthys olivaceus; ascites; Edwardsiella tarda; Aeromonas hydrophila; immunogenicity; 【基金】 河北省重大科技攻关项目(06780503)【分类号】S943
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