细胞与分子免疫学杂志 , Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology,
编辑部邮箱 , 2011年10期
【作者】 罗彬； 云翔； 林永达； 肖绍文； 闫光华； 何少健； 贺菽嘉； 陈芳； 谢小薰；

【Author】 LUO Bin1, YUN Xiang2△, LIN Yong-da1, XIAO Shao-wen2, YAN Guang-hua1, HE Shao-jian1, HE Shu-jia3, CHEN Fang1, XIE Xiao-xun1* 1Department of Histology and Embryology, 2First Affiliated Hospital, 3Department of Biochemistry, Guangxi Medical University, Nanning, 530021, China

【机构】 广西医科大学组织胚胎学教研室； 广西医科大学第一附属医院； 广西医科大学生化教研室； 广西医科大学；

【摘要】 目的:构建ACRBP真核表达载体,建立稳定表达ACRBP的人肝癌细胞株,为后继研究该基因的功能奠定基础。方法:以pMAL-C2/ACRBP重组质粒作为模板进行PCR,扩增出ACRBP编码区cDNA,并与真核表达载体pEGFP-N1连接,构建pEGFP-N1/ACRBP重组质粒。通过Fugene HD将该重组质粒转染至ACRBP表达阴性的肝癌细胞株HepG2,经G418筛选阳性克隆获得稳定转染株。RT-PCR和免疫组织化学方法检测HepG2细胞中ACRBP的表达情况。结果:pEG-FP-N1/ACRBP真核表达载体经测序证实插入序列完全正确;ACRBP基因已经稳定转染至HepG2细胞中并获得表达。结论:成功构建了pEGFP-N1/ACRBP真核表达载体并将其转染HepG2后,能稳定地表达ACRBP。 更多还原

【Abstract】 AIM: To construct the eukaryotic expression vector pEGFP-N1/ACRBP and stably express ACRBP in human hepatocarcinoma cells, providing functional clues for ACRBP. METHODS: A recombinant plasmid pMAL-C2/ACRBP was used as a template to amplify ACRBP cDNA. The PCR product was ligated into an eukaryotic expression vector pEGFP-N1 to construct a recombinant plasmid pEGFP-N1/ACRBP. Then the pEGFP-N1/ACRBP was transfected by Fugene HD into ACRBP-negative HepG2 cells. The stably transfected clones were se... 更多还原
【关键词】 ACRBP； 基因克隆； 转染；
【Key words】 ACRBP； gene cloning； transfection；
【基金】 国家自然科学基金资助项目(30760055,81060207);广西高发疾病研究创新性团队基金资助项目(桂教人[2007-71]号);广西自然科学基金(桂科自0832144);广西教育厅立项项目(201010LX029),广西教育厅研究生创新计划项目(2009105981001M190);广西医学科学实验中心开放项目(KFJJ2010-33);广西大型仪器网协助项目(6912008104)【分类号】R735.7

中华医学之家：http://www.xinxi85.com

投稿信箱：zhyxzj85@163.com

联系电话：029--85327298     主编QQ：693891972