SHH-N基因腺相关病毒表达载体的构建及其对神经干细胞增殖相关基因的影响
Construction and identification of SHH-N gene adeno-associated virus vector and its impact on genes related to proliferation in neural stem cells推荐 CAJ下载 PDF下载 不支持迅雷等下载工具，请取消加速工具后下载。
【作者】 刘东升； 崔岩； 申仑； 杜延平； 李桂林； 王任直； 王岩； 张波；

【Author】 LIU Dong-sheng1,CUI Yan1,SHEN Lun1,DU Ya-nping1,LI Gui-lin2,WANG ReN-zhi2,WANG Yan3,ZHANG Bo1(1.Dept.of Neurosurgery,Dalian Medical University,Dalian 116011;2.Dept.of Neurosurgery,Peking Union hospital,CAMS & PUMC,Beijing 100730;3.Neurosurgery Department,Yuquan Hospital,Tsinghua University,Beijing 100730,China)

【机构】 大连医科大学附属第一医院神经外科； 中国医学科学院北京协和医院神经外科； 清华大学玉泉医院神经外科疼痛病区；

【摘要】 目的构建rAAV-SHH-N-EGFP载体并检测其对神经干细胞增殖相关基因影响。方法分离并培养大鼠脑室下区神经干细胞,提取RNA、反转录、PCR得到SHH-N的cDNA,克隆入pSNAV2.0-CMV-IRES-EGFP,包装得到腺相关病毒rAAV-SHH-N-EGFP,感染神经干细胞48 h后,采用实时定量PCR检测SHH信号通路下游相关基因的mRNA水平变化,并观察rAAV-SHH-N-EGFP载体在神经干细胞内的表达情况。结果 (1)克隆得到SHH-N基因,测序结果与NCBI报道序列一致。(2)成功构建pSNAV2.0-CMV-SHH-N-IRES-EGFP表达载体并鉴定,包装得到rAAV-SHH-N-EGFP。(3)实时定量PCR分析rAAV-SHH-N-EGFP感染神经干细胞48 h后,rAAV-SHH-N-EGFP处理组较感染rAAV-EGFP的对照组,Gli1和Nmyc的mRNA水平上调。(4)rAAV-SHH-N-EGFP可有效感染神经干细胞,在感染14 d后稳定表达SHH-N。结论成功构建rAAV-SHH-N-EGFP过表达载体并使其在神经干细胞内稳定表达。过表达SH... 更多还原

【Abstract】 Objective To construct and identify SHH-N gene adeno-associated virus vector and to detect its effect on genes controlling to proliferation in neural stem cells(NSCs).Methods The neural stem cells in the subventricular zone of postnatal rat brain were used to collect SHH-N.pSNAV2.0-CMV-SHH-N-IRES-EGFP was established by enzyme cutting and ligation,and then transfected packaging cell line 293T.Real time PCR was performed after SHH-N transfection of neural stem cells by rAAV-SHH-N-EGFP vector for ... 更多还原

【关键词】 神经干细胞； SHH信号通路； Nmyc基因；
【Key words】 neural stem cells； SHH signal pathway； Nmyc gene；

【基金】 大连市科技计划项目(2008J99JH268);;辽宁省教育厅高等学校科研计划(L20100108)

【文献出处】 基础医学与临床, Basic & Clinical Medicine, 编辑部邮箱 , 2011年03期 【DOI】CNKI:SUN:JCYL.0.2011-03-016 【分类号】R346
【参考文献】
[1] 窦万臣; 王任直; 李桂林; 张波; 田士强; 姚勇; 王欣;   新生大鼠神经干细胞的培养方法[J]. 基础医学与临床 2003年06期
[2] 孙朝晖; 赖燕来; 曾文文; 左焕琮; 谢佐平;   Wistar大鼠SONIC HEDGEHOG基因的克隆和表达[J]. 基础医学与临床 2005年01期
【相似文献】
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[2] 李兴强; 纪全松;   神经干细胞移植对Alzheimer病的影响[J]. 中国当代医药 2010年34期
[3] 卢艺; 张莹; 褚晓凡; 邹良玉; 唐冰杉;   依达拉奉抗谷氨酸诱导神经干细胞凋亡作用的实验研究[J]. 海南医学 2011年02期
[4] 王春亮; 刘瑞莲;   干细胞移植与运动性颅脑损伤的修复[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2010年40期
 [5] 王书新; 唐洲平; 潘邓记;   神经干细胞定向诱导分化为神经元的方法学研究进展[J]. 神经损伤与功能重建 2011年01期
[6] 张可斌; 刘瑞莲;   神经干细胞诱导分化及在运动医学研究领域的应用[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2010年40期
[7] 张任飞; 肖诗柔;   神经营养素家族类细胞因子对神经干细胞分化影响的研究现状[J]. 中国科技信息 2011年02期
[8] 张国福; 林建华;   神经干细胞的研究进展[J]. 福建中医药 2003年03期
 [9] 鲍南; 施诚仁;   神经干细胞研究现状[J]. 上海第二医科大学学报 2005年02期
[10] 白琳琳; 杨春; 章茜; 张朝; 王书春; 范波胜;   神经干细胞移植入Alzheimer病模型鼠脑内的存活和分化[J]. 实用神经疾病杂志 2005年02期

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