人RNF6基因原核表达载体的构建及其重组蛋白的表达 Construction of prokaryotic plasmid of human RNF6 gene and identification of its recombinant protein推荐 CAJ下载 PDF下载 不支持迅雷等下载工具,请取消加速工具后下载。
解剖科学进展 , Progress of Anatomical Sciences, 编辑部邮箱 , 2011年05期 【作者】 刘彤; 李洋; 李丹妮; 李丰;
【Author】 LIU Tong1, LI Yang1, LI Dan-ni2, LI Feng1* (1.The Research Center for Cell Biology, Key Laboratory of Medical Cell Biology Ministry of Public Education of China,China Medical University; 2. 94K, Faculty of Clinical Medicine, China Medical University, Shenyang 110001 China)
【机构】 中国医科大学基础医学院细胞生物教研室教育部医学细胞生物学重点实验室; 中国医科大学;
【摘要】 目的构建人hRNF6基因的原核表达载体并诱导和鉴定其融合蛋白表达。方法提取前列腺癌细胞CWR22Rv1的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增hRNF6全长编码基因,并将其克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,在E.coli BL21中诱导GST-hRNF6融合蛋白表达,并经免疫印迹鉴定结果。结果 hRNF6编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,双酶切及测序鉴定正确,并在E.coli BL21中获得了诱导表达,蛋白的分子量为104KD,免疫印迹检测到了融合蛋白表达。结论成功构建基因原核表达载体,诱导表达出GST-RNF6融合蛋白。 更多还原
【Abstract】 Objective To construct an prokaryotic expression vector of hRNF6(human ring finger protein 6)gene and identify its recombinant protein expression induced by isopro-pyl-1-thio-b-Dgalactopyranoside(IPTG). Methods Total RNA of hRNF6 gene was extracted from prostate cell line CWR22Rv1, The hRNF6 coding sequence was amplified by polymerase chain reaction(PCR) method and cloned it into pGEX-5X-1. The expression of GST-hRNF6 fusion protein was induced by IPTG and identified by Western blot. Results The... 更多还原 【关键词】 人hRNF6基因; 原核表达; 融合蛋白; E.coli BL21; 【Key words】 hRNF6; prokaryotic expression; fusion protein; E.coli BL21; 【基金】 国家自然科学基金重大研究计划(No.90813038)【分类号】Q782
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