【摘要】  目的：对珍珠滴丸进行组方研究，筛选中药新药珍珠滴丸的有效组分配伍，为新药开发打基础。方法：以口腔粘膜溃疡愈合的药效学试验为评价指标，用正交t值法实验设计进行处方组成及其配比研究，通过正交实验的交互作用和方差分析，探讨组方中药味的主次及相互关系。结果：从药效学实验看羊耳菊有极显著性影响(P<0.01)，甘草有显著性影响(P<0.05)，冰片、珍珠影响不显著。冰片与珍珠有明显的交互作用(P<0.05)，根据极差大小最佳配比为羊耳菊、甘草、珍珠和冰片比例为100：20：2：1。结论：四药合用能明显缩短冰醋酸致大鼠口腔粘膜溃疡愈合时间，说明该方组方合理，为中药开发提供了新思路。

【关键词】  珍珠滴丸; 口腔粘膜溃疡; 交互作用; 组方研究

　　复发性口腔溃疡的病因主要与微生物感染、消化系统疾病及功能紊乱、内分泌失调、神经精神因素、遗传因素、某些微量元素和和维生素缺乏、免疫功能失调等因素有关[1～3]。中药采用抗菌消炎，调节机体免疫及内分泌功能，改善微循环等方法治疗。与西药相比，中医药治疗可多途径、多靶点综合起效，有疗效好、毒副作用小的优点。笔者拟总结中医治疗临床用药经验结合部分药效实验，开发以有效组分配伍的创新中药复方珍珠滴丸 。为进一步探讨组方中羊耳菊、甘草经提取后其组方及配比的合理性，在民间使用的基础上，根据本方的临床用途，以口腔粘膜溃疡愈合的药效学试验为评价指标，用正交t值法实验设计进行处方组成及其配比研究，通过正交实验的交互作用和方差分析，探讨组方中药味的主次及相互关系，找到最佳组方配比。

　　1 材料

　　1.1 动物

　　SD大鼠，雄性，体重180～220g，由贵阳医学院实验动物中心提供。

　　1.2 试药与仪器

　　羊耳菊、甘草、珍珠、冰片均购于贵州省药材公司,经贵阳医学院龙庆德教授鉴定,符合《中国药典》2000版及2003版《贵州省中药材民族药材质量标准》，0.5%羧甲基纤维素钠溶液，10%水合氯醛，10%醋酸溶液。

　　2 方法与结果

　　2.1 处方中药味的分析

　　实验药物的配置：按表1处方比例称取羊耳菊和甘草药材，加10倍量水煎煮3次，每次1小时，滤过;珍珠粉碎成细粉，过筛(150目)，冰片研细，临时配制。试验前以0.5%羧甲基纤维素钠溶液超声混匀。

　　实验方法：取造膜成功[取SD大鼠，雄性，体重180～220g，10%水合氯醛(0.4ml/100g)麻醉后将10%醋酸溶液50μl注入大鼠口腔颊黏膜下，24小时后形成溃疡(表面灰白色、圆形或椭圆形溃疡，直径在4.5～5.5mm之间)，即造膜成功。]的大鼠80只，随机分8组。水平1为羊耳菊、甘草、珍珠、冰片均不用药;水平2为羊耳菊：甘草：珍珠：冰片=100：20：2：1。以上各组大鼠于造模第2天开始，于溃疡局部给药(0.05ml/只、0.25ml/kg) ，1～8组的给药剂量(剂量g/kg/d)分别为：0、0.015、0.102、0.107、0.493、0.498、0.585、0.600。每天2次(上下午各1次)，连续5天。每天给药前观察记录溃疡面大小(以溃疡直径计)及溃疡愈合情况(无肉眼可见的溃疡视为愈合)，第6天观测后处死动物。每只动物按不同时间溃疡直径(mm)经回归处理后，计算50%愈合时间，以此为指标进行统计分析。结果见表1。

　　试验结果表明，本方药味对药效影响顺序为羊耳菊>甘草>冰片>珍珠，其中羊耳菊有极显著性影响(P<0.01)，甘草有显著性影响(P<0.05)，冰片、珍珠影响不显著。但从表1中A8组结果(明显降低口腔粘膜溃疡愈合时间)可看出冰片、珍珠对本方可能存在交互作用，我们采用正交t值法对组方中各药味的交互作用作进一步分析。

　　2.2 处方中各药味交互作用分析

　　实验药物的配置同2.1项下。

　　实验方法：将方中贡献较大的羊耳菊、甘草配合使用作为基础方(100：20)，加入珍珠和冰片(即珍珠、冰片设置水平1：不用药;水平2：用药珍珠：冰片=2：1)，共4个配比组进行试验。1～4组的给药剂量(剂量g/kg/d)分别为：0.585、0.590、0.595、0.600。结果见表2。表1 L8(27)正交t值法实验表及结果表2 L4(23)正交t值法实验表及结果交互作用分析见表3。表3 交互作用分析

　　2.3 组方配比分析

　　实验药物的配置同2.1项下。

　　实验方法：将方中各味药材设计高中低3个剂量，中剂量羊耳菊、甘草、珍珠和冰片比例为100：20：2：1，共9个组，采取正交法，以药效指标对组方配比进行试验研究。试验方法同前。结果见表4。

　　试验结果表明，各给药组均能对抗由醋酸所致大鼠口腔粘膜溃疡，加快溃疡面愈合的作用。从表4和图1中的结果直观分析，各药味因素影响溃疡愈合效果的顺序为羊耳菊>珍珠>甘草>冰片，其中羊耳菊对药效影响较大;正交实验方差分析结果表明，羊耳菊的剂量改变对药效的影响具有统计学意义(P<0.05)，其余三味药影响不显著。根据极差大小最佳配比为A2B2C1D2，即羊耳菊、甘草、珍珠和冰片比例为100：20：2：1。表4 L9(34)正交实验表及结果

　　3 讨论

　　口疮为常见病多发病，组方中羊耳菊临床用于治疗急性扁桃体炎、慢性支气管炎、关节炎等[4]。甘草具有广泛的药理活性，如抗炎抗过敏反应，抗菌抗病毒作用，镇咳祛痰作用等[5]。珍珠具有抗溃疡作用[6]。冰片具有明显的抗菌抗炎、镇静镇痛作用[7] 。通过对本方组方及配比的合理性研究，确定了本方的组方及组方配比，同时验证了本方民间用药的合理性。

　　本方源于民间验方，民间以散剂用于治疗口腔粘膜溃疡，由于散剂存在质量不稳定，服用剂量不准确，携带、使用不便等缺点，不利于临床推广应用。根据处方药材中化学成分的理化性质，以药效学试验和化学成分的动态变化为指标，方中羊耳菊、甘草采用大孔树脂富集精制，珍珠、冰片粉碎入药的工艺，利用固体分散技术制备口含滴丸，滴丸剂具有服用剂量准确，携带、使用、贮藏方便，质量稳定可控等优点。本方治疗口腔溃疡，病在口腔，依据中医“就近攻邪”理论，药物直达病所，可提高局部口腔粘膜对药物的吸收，起到快速的治疗作用。经药效学试验和临床初步验证均得到满意的结果。与同类品种比较，具有方精力专、药用成分基本清楚、临床应用安全有效、质量稳定可控等特点。达到研制临床使用“三效”、“三小”、“五便”的制剂研究目的。

【参考文献】
  　1 郑麟蕃，张震.实用口腔科学.北京:人民卫生出版社,1993，589.

　　2 魏玉芬，董玉宏.复发性口腔溃疡的病因及治疗.张家口医学院学报，2001,18(2):86.

　　3 高朋杰，程立山，谭亚荣，等.口腔阿弗它溃疡的病因探索.黑龙江医学，2006,30(7):559.

　　4 国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部.北京：化学工业出版社，2005：627.

　　5 于辉，李春香，宫凌涛，等.甘草的药理作用概述.现代医学生物进展，2006,16(4):77.

　　6 黄清萍，盘红梅.珍珠的药理作用及临床应用.时珍国医国药，2000,11(6):564～565.