【摘要】  参照部颁标准03册(WSB052791)，按照药品注册管理办法，将冬凌草片剂改为冬凌草胶囊，按中药注册分类9进行申报。结合所申报剂型的特点，进行了含量测定方法研究。

【关键词】  消旋卡多曲; 分散片; 正交设计

　为了有效地控制冬凌草胶囊的质量，本研究参考有关的文献资料[1]，对主药中的冬凌草甲素进行了含量测定的研究，并进行了系统性实验和方法学考察。

　　1 仪器与试剂

　　仪器：高效液相色谱仪(LC10ATVP);试剂：甲醇为色谱纯;对照品：冬凌草甲素(来源：自制)。

　　2 色谱条件：

　　色谱柱：C18 5μm 4.6×250mm(柱号：E1616123);流动相：甲醇：水(50：50)为流动相(本实验通过对甲醇水，甲醇水冰醋酸，甲醇水磷酸，甲醇0.2mol/L磷酸氢二钠，甲醇乙腈0.04%磷酸溶液，乙腈水等不同比例的流动相进行实验，发现甲醇水比例为50：50的系统分离效果较好，故选择本系统为流动相。理论板数按冬凌草甲素峰计算不得低于6000，且冬凌草甲素与相邻峰的分离度大于2.0);柱温：室温;波长：238nm;流速：1.0ml/min;检测波长：选用238 nm为检测波长。

　　3 样品溶液的制备和测定方法

　　3.1 对照品溶液的制备

　　精密称取在60℃减压干燥2小时的冬凌草甲素对照品适量，加甲醇制成每1ml含35μg冬凌草甲素的对照品溶液，即得。

　　3.2 供试品溶液的制备

　　取装量差异项下的本品20粒，精密称定，研细，混匀，取0.75g，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相超声溶解，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。

　　3.3 测定方法

　　分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。

　　3.4 线性范围的考察

　　精密称取在60℃减压干燥2小时的冬凌草甲素对照品适量，加甲醇制成每1ml含冬凌草甲素0.1785mg的对照品溶液，作为储备液,摇匀。分别精密量取该溶液0.5ml、1ml、2ml、4ml、5ml置10ml量瓶中，用甲醇依次稀释成系列对照品溶液。照上述色谱条件分别进样20 μl，记录色谱峰面积分别是：2105837;4192602;8527430;16703062;21687346。将峰面积A对相应的浓度C进行回归处理得标准曲线A=240928.7C-108189，r =0.9996，结果表明：冬凌草甲素在8.925～89.25μg/ ml浓度范围内，其峰面积与相应的浓度呈良好的线性关系。

　　3.5 精密度试验

　　取上述对照品溶液(每1ml含35.70 ug冬凌草甲素),照上述高效液相色谱法重复测定5次，结果见表1。

　　3.6 样品溶液的稳定性试验

　　按含测定方法，取同一批冬凌草胶囊样品(批号：20060810)，每隔一定时间测定其中冬凌草甲素的含量，表明被测溶液在8小时内稳定。结果见表2。表1 同一样品连续5次测定峰面积结果表2 同一样品在8小时内测定结果

　　3.7 样品的重现性试验

　　按含测定方法，取同一批冬凌草胶囊样品(批号：20060810)，进行多次测定，测得峰面积并计算其中冬凌草甲素的含量，结果见表3。表3 同一样品重现性测定结果

　　3.8 阴性样品干扰的考察

　　按供试品样品的制备方法，取缺冬凌草的样品，照处方制备阴性对照品溶液，按含量测定方法测定，结果表明阴性对照品无干扰，含量测定方法可行。

　　3.9 加样回收实验

　　在已测含量的冬凌草胶囊样品(批号：20060810)中，加入精密称定的对照品，再按上述高效液相色谱法测定其中的冬凌草甲素的含量，并计算其回收率，结果见表4。表4 样品加样回收实验结果

　　4 样品检验结果

　　根据上述色谱条件对10批小试样品的三批中试样品进行含量测定,结果见表5。表5 三批中试样品含量测定结果

　　5 讨论

　　冬凌草胶囊为本公司新药品种，其今量测定方法未见报道，根据处方和工艺研究，按照药品标准草案[2]进行了系统的含量测定方法研究。根据文献[3]，对流动相进行了实验，结果甲醇：水为50：50分离效果较好。通过加样回收、精密度、稳定性、重现性实验，表明系统是可行的，方法是可靠的。

【参考文献】
  　1 中国药典2005年版一部，附录VID.

　　2 《药品注册管理办法》(试行).

　　3 鲁彦毫，等.HPLC法测定冬凌草片中冬凌草甲素的含量.中国药事，2001，15(1)：47～48.