HPV16 E7基因慢病毒载体的构建及鉴定 Construction and identification of HPV16 E7 gene recombinant lentivirus vector推荐 CAJ下载 PDF下载 不支持迅雷等下载工具,请取消加速工具后下载。 【作者】 赖云建; 周春丽; 王儒鹏; 何威;
【Author】 LAI Yunjian,ZHOU Chunli,WANG Rupeng,HE Wei Department of Dermatology,Xingqiao Hospital of Third Military Medical University,Chongqing 400037,China
【机构】 第三军医大学新桥医院皮肤科;
【摘要】 目的构建HPV16 E7慢病毒表达载体。方法用RT-PCR方法从Caski细胞中扩增HPV16 E7基因的编码区序列,对扩增出目的片段酶切纯化后将目的片段交换连接入慢病毒表达质粒,酶切鉴定并测序正确后进行慢病毒包装和滴度测定。Western-blot验证3FLAG-E7融合蛋白在293 T细胞中的表达。结果成功获得HPV16 E7基因,成功将HPV16 E7克隆到慢病毒表达质粒中,且包装产生的慢病毒颗粒能成功表达3FLAG-E7融合蛋白。结论成功构建HVP16 E7和flag基因共表达的慢病毒表达载体,为进一步研究HPV16 E7基因的功能建立了高效稳定的转基因技术平台。 更多还原
【Abstract】 To further study on the function of HPV16 E7 gene,we constructed a lentiviral expression vector carrying HPV16 E7.We amplified the full-length HPV16 E7 gene from the total RNA of the Caski cell by RT-PCR technique,then subcloned the gene into pLV-UbC-3FLAG vector,which was identified and confirmed by restricting enzyme digestion and DNA sequencing.After the above steps,recombinant lentiviruses were produced in 293T cells following the cotransfection of pLV-3FLAG-E7,packaging plasmids of pCD/NL-B... 更多还原
【关键词】 HPV16E7基因; 慢病毒载体; 293T细胞; 【Key words】 HPV16 E7; Lentivirus vector; 293Tcells;
【基金】 国家自然科学基金(30972646)
【文献出处】 免疫学杂志, Immunological Journal, 编辑部邮箱 , 2011年04期 【DOI】CNKI:SUN:MYXZ.0.2011-04-016 【分类号】R392.32 【参考文献】 [1] 陈钢; 张绍祥; 岳娟娟; 杨星; 张正治; 携EGFP的人Synoviolin基因慢病毒表达载体的构建与鉴定[J]. 免疫学杂志 2010年05期 【相似文献】 [1] 李望; 孙晓青; 胡书群; 裴东生; 陈波; 大鼠FasL基因重组慢病毒载体三质粒包装细胞系统的建立[J]. 徐州医学院学报 2006年01期 [2] 杨玉芳; 丁彦青; 梁丽; 翁德胜; LMP1基因重组慢病毒载体的构建及表达性能鉴定[J]. 中华实验和临床病毒学杂志 2006年03期 [3] 郑德华; 石炳毅; 蔡明; Andrew M.L.Lever; 慢病毒介导大鼠肾脏基因转染的实验研究[J]. 山东医药 2004年14期 [4] 李振宇; 徐开林; 潘秀英; 鹿群先; 主鸿鹄; 何徐彭; 含绿色荧光蛋白的慢病毒载体的构建及表达[J]. 徐州医学院学报 2004年02期 [5] 鲁可可; 朱虎; 胡艳秋; 袁娲; 周作民; 沙家豪; 李建民; 表达人泛素样修饰子基因细胞株的构建及其鉴定[J]. 南京医科大学学报(自然科学版) 2004年04期 [6] 杨宇娟; 裴冬生; 徐开林; 潘秀英; 何徐彭; 张成静; survivin反义RNA的克隆及慢病毒载体的构建[J]. 徐州医学院学报 2005年06期 [7] 邓少丽; 胡福泉; 蹇锐; 饶贤才; 蒋静; 程小星; 慢病毒载体感染终末分化骨髓瘤细胞的研究[J]. 中国现代医学杂志 2006年07期 [8] 马巍; 吴学元; 陈炜; 刘广宇; 慢病毒转染造血干细胞介导的肿瘤基因治疗的研究进展[J]. 现代肿瘤医学 2006年06期 [9] 马强; 李明; 吴英松; 以痘苗病毒为辅助病毒生产慢病毒载体的探究[J]. 热带医学杂志 2006年05期 [10] 李跃萍; 宋丽萍; 邱曙东; 慢病毒载体在肿瘤基因治疗中的应用[J]. 现代肿瘤医学 2006年12期
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