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隋江东; 李华; 吴玉章; NLRP1基因启动子区荧光素酶报告载体的构建与鉴定
论文编辑部-新丝路理论网   2011-05-13 11:01:03 作者:中华医学之家:http://www.xinxi85.com 来源: 文字大小:[][][]

NLRP1基因启动子区荧光素酶报告载体的构建与鉴定
Construction and identification of luciferase reporter gene vectors containing two haplotypes DNA of human NLRP1 gene promoter region推荐 CAJ下载 PDF下载 不支持迅雷等下载工具,请取消加速工具后下载。
【作者】 隋江东; 李华; 吴玉章;

【Author】 SUI Jiangdong,LI Hua,WU Yuzhang Institute of Immunology,PLA,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China

【机构】 第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所; 成都军区总医院肿瘤科;

【摘要】 目的构建人NLRP1(nucleotide-binding,leucine-rich repeat pyrin domain containing protein 1)基因启动子区SNPrs878329位点两种单倍体荧光素酶报告基因载体。方法分别以SNP rs878329的GG和CC基因型的人基因组DNA为模板,用PCR法扩增出包含该位点的长476 bp的NLRP1基因启动子区目的片段,用KpnⅠ/BglⅡ双酶切,切胶回收后分别与同样双酶切的荧光素酶报告基因载体PGL3-promoter相连接,构建pGL3-promoter-G和pGL3-promoter-C两个表达质粒,并测序验证其DNA序列。结果成功构建了人类NLRP1基因启动子SNP rs878329的两种纯合子基因型(GG型和CC型)的荧光素酶报告载体,且测序得以证实。结论成功构建出的荧光素酶报告载体,为研究NLRP1基因启动子SNP rs878329能否调控NLRP1基因表达提供了基本实验条件。 更多还原


【Abstract】 This study is aimed to construct a luciferase reporter gene vector containing two different haplotypes DNA on SNP rs878329 of human NLRP1 gene promoter region.The 476 bp DNA fragments of NLRP1 promoter region including the SNP rs878329 were obtained by polymerase chain reaction(PCR) based on human genome DNA from the subjects with the GG/CC genotypes.Then the DNA fragments were digested by restriction endonucleases KpnⅠ and BglⅡ.After fragment recovery,those fragments were ligated to pGL3-promot... 更多还原

【关键词】 NLRP1基因; 单个核苷酸多态性; 单倍体; 荧光素酶报告基因;
【Key words】 NLRP1 gene; Single nucleotide polymorphism; Haplotype; Luciferase reporter gene;


【文献出处】 免疫学杂志, Immunological Journal, 编辑部邮箱 , 2011年04期 【DOI】CNKI:SUN:MYXZ.0.2011-04-015 【分类号】Q78
【参考文献】
[1] 闫鸿斌; 高闪电; 贾万忠; 才学鹏;   细胞内模式识别受体研究进展[J]. 免疫学杂志 2008年03期
 【相似文献】
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[2] 黄天华;   男性单倍体遗传学研究进展(1978~1992)[J]. 国际遗传学杂志 1992年03期
 [3] 陈卫; 苏踊跃; 梁光萍; 陈建; 张曼辉; 罗向东;   β1整合素启动子荧光素酶报告基因载体的构建与鉴定[J]. 山西医科大学学报 2006年09期
[4] 全硕; 潘国宗; 刘东远; 鲁重美; 左瑾; 方福德;   重组人甲胎蛋白基因顺式调控元件功能的研究[J]. 基础医学与临床 1999年01期
[5] 纪树荃; 陈惠仁; 王恒湘;   单倍体相合未去T细胞骨髓移植治疗高危白血病[J]. 医学研究杂志 2003年04期
[6] 杨瑗; 洪源; 成军; 赵英仁; 黄燕萍; 王建军;   HBsAg基因启动子Ⅰ DNA结合蛋白1下调IL-18基因启动子[J]. 世界华人消化杂志 2004年12期
[7] 蔡春芳; 蔡俐琼; 王泽华;   含mdr1启动子的荧光素酶报告基因质粒的构建[J]. 华中医学杂志 2005年06期
[8] 程爱娟; 毛用敏; 崔让庄;   载脂蛋白AⅠ基因启动子和内含子1中的单核苷酸多态性对其表达的影响[J]. 中华医学遗传学杂志 2006年06期
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[10] 洪晓俊; 张绪清; 邓国宏;   CⅡTA基因启动子Ⅳ区G-944C多态性与慢性HBV感染发病易感性的关系研究[J]. 第三军医大学学报 2006年22期

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