gp350及gp350-C3d3融合基因真核载体的构建及其免疫功能研究
Construction of gp350 gene and gp350-C3d3 fusion gene eukaryotic expression vectors and the study of its immunity推荐 CAJ下载 PDF下载 不支持迅雷等下载工具，请取消加速工具后下载。
【作者】 宋天喜； 曹朝晖； 江伟凡； 董世访； 杨桦；

【Author】 Song Tianxi,Cao Zhaohui,Jiang Weifan,Dong Shifang,Yang Hua Department of Otolaryngeology,Xinqiao Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400037,China.

【机构】 第三军医大学新桥医院耳鼻咽喉头颈外科； 南华大学生物化学与分子生物学教研室；

【摘要】 目的构建EB病毒包膜糖蛋白gp350全长序列及其与3个补体片段C3d串联基因在人体真核细胞中表达的载体,并进行其免疫功能的初步研究。方法将gp350基因序列分别与经BglⅡ和BamHⅠ双酶切的真核表达载体pSG.SS.YL和pSG.SS.C3d3.YL连接,转化后挑取阳性克隆进行PCR、酶切鉴定并测序;将重组载体利用脂质体法分别转染人类Hela细胞培养1624 h后,用Western blot及细胞免疫组化染色检测gp350蛋白和gp350-C3d3融合蛋白的表达。结果成功构建含gp350全长基因序列的载体pSG.SS.gp350.YL和pSG.SS.gp350.C3d3.YL,并能够转染人类Hela细胞;经细胞免疫组织化学染色及Westernblot蛋白检测转染组均能常规水平表达,对照组则无该蛋白表达,但两转染组的表达量无明显差异。结论构建成功含有gp350的2个真核表达质粒并能够在人体细胞中表达相应蛋白,为下一步进行检测功能性试验奠定基础。 更多还原

【Abstract】 To study the function of gp350,we constructed two eukaryotic expression vectors containing gp350 gene.gp350 full-length cDNA was amplified by polymerase chain reaction with plasmid of pcDNA3.1+gp350 as a template.PCR product was digested by restriction enzymes BglⅡand BamH,and then cloned to sites between BglⅡand BamHⅠof pSG.SS.YL and pSG.SS.C3d3.YL,respectively.The positive clones were identified by PCR,restriction enzymes digestion and DNA sequencing.Hela cells were transient transfected by re... 更多还原

【关键词】 EB病毒； 鼻咽癌； gp350； DNA疫苗；
【Key words】 Esptein-Barr virus； Nasopharyngeal carcinoma； gp350； DNA vaccines；

【基金】 重庆市自然科学基金(CSTC2006BB5108)

【文献出处】 免疫学杂志, Immunological Journal, 编辑部邮箱 , 2011年05期 【DOI】CNKI:SUN:MYXZ.0.2011-05-008 【分类号】R392.1
 【参考文献】
[1] 毕晓云; 潘恩山; 吴志东; 曹玉华; 胡勇;   肺炎结合疫苗PPS14-OVA、PPS14-C3d在小鼠脾脏的定位及补体对定位的影响[J]. 免疫学杂志 2010年02期
[2] 刘树雷; 何威; 王儒鹏; 吴军; 胡小红;   Luffin P1-KDEL的构建、表达、纯化及鉴定[J]. 免疫学杂志 2010年01期 [3] 许桂莲; 姜曼; 郭波; 吕燕波; 邹丽云; 费蕾; 黄云辉; 陈永文; 牟芝蓉; 吴玉章;   FLK1265-2493与C3d3融合基因真核表达质粒的构建及表达[J]. 免疫学杂志 2006年03期
[4] 樊惠英; 刘中勇; 佟铁铸; 刘星; 郭爱珍;   C3d-M28增强伪狂犬病毒gC基因体液免疫[J]. 生物工程学报 2009年07期