雪卡毒素单克隆抗体的制备及鉴定
Preparation and identification of monoclonal antibodies against ciguatoxin推荐 CAJ下载 PDF下载 不支持迅雷等下载工具，请取消加速工具后下载。

免疫学杂志 , Immunological Journal,
编辑部邮箱 , 2011年10期 【作者】 张彩霞； 闫鸿鹏； 郑杰； 周丽华； 张焜； 赵肃清；

【Author】 ZHANG Caixia,YAN Hongpeng,ZHENG Jie,ZHOU Lihua,ZHANG Kun,ZHAO Suqing Department of Pharmacy Engineering,Faculty of Chemical Engineering and Light Industry,Guangdong University of Technology,Guangzhou 510006,China

【机构】 广东工业大学轻工化工学院；

【摘要】 目的制备雪卡毒素的单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以雪卡毒素类似物莫能菌素为半抗原,分别采用混合酸酐法将其与载体牛血清白蛋白(BSA)偶联合成免疫抗原M-BSA,碳二亚胺法与卵清白蛋白(OVA)偶联合成包被抗原M-OVA。以M-BSA免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤。以自制雪卡毒素提取物为竞争抗原,间接竞争ELISA法筛选稳定分泌雪卡毒素抗体的特异性细胞株。小鼠体内诱生腹水,辛酸硫酸铵沉淀法进行纯化。采用抗体亚型鉴定试剂盒鉴定所得抗体的亚型,间接竞争ELISA法鉴定抗体的特异性和交叉性。结果获得3株稳定分泌抗雪卡毒素抗体的杂交瘤细胞株1D5、2G11、3G11,其Ig亚型均属于IgG1亚型。交叉反应结果表明3株单克隆细胞产生的抗体除与莫能菌素有较高的交叉反应外,与其他雪卡毒素类似物均无明显交叉反应。结论成功筛选到了分泌雪卡毒素抗体的细胞株,为雪卡毒素免疫分析方法的进一步研究奠定基础。 更多还原

【Abstract】 This study aims to prepare monoclonal antibodies(McAbs) against ciguatoxin and to characterize their properties.Mixed anhydride and EDC methods were used for coupling monensin with BSA/OVA to prepare immunogen and coating antigen of CTXs respectively.Balb/c mice were immunized with artificial ciguatoxin antigen M-BSA,and hybridoma was generated with immunized mouse spleen cells and Sp2/0 myeloma cells.The hybridoma cell lines which secret McAbs against ciguatoxin were selected and subcloned 4 ti... 更多还原
【关键词】 雪卡毒素； 莫能菌素； 单克隆抗体； 间接竞争ELISA；
【Key words】 Ciguatoxin； Monensin； Monoclonal antibody； ELISA；
【基金】 国家自然科学基金(20872020,20672023);广东省自然科学基金(8251009001000005)【分类号】R392

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